真空吸種置床儀對葡萄種子的培養(yǎng)分析
葡萄種子的發(fā)芽率是影響葡萄產(chǎn)量以及口感的一個(gè)重要原因，同時(shí)由于葡萄有種皮所含抑制物質(zhì)及機(jī)械障礙，即使有成熟胚也難以萌發(fā)，但若將成熟胚取出在培養(yǎng)基上萌發(fā)，則會提高萌發(fā)率且可省去低溫處理過程。因此我們設(shè)計(jì)了使用真空吸種置床儀對葡萄種子培養(yǎng)進(jìn)行胚發(fā)育，再結(jié)合胚培養(yǎng)以提高萌發(fā)率的方法，獲得了較好的結(jié)果。
l 材料與方法
試驗(yàn)于2004~2005年在西北農(nóng)業(yè)大學(xué)進(jìn)行，試材為歐洲葡萄極早熟品種莎巴珍珠。
用0.1%升汞水溶液將果實(shí)表面消毒10分鐘，無菌水沖洗3~5次，于無菌條件下肺剖出種子，在培養(yǎng)基上培養(yǎng)。所用基本培養(yǎng)基為MS+5%蔗糖十0.6%瓊脂十LH100ppm.
種子培養(yǎng)結(jié)束后解剖出胚，在顯微鏡下測量胚長，作為處理物劣的指標(biāo)。從基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)二個(gè)月的種子中取出胚進(jìn)行培養(yǎng)。胚培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為胚萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)是子葉張開并轉(zhuǎn)綠。培養(yǎng)基pH均調(diào)至5.8,培養(yǎng)溫度為25士1℃。種子培養(yǎng)在室內(nèi)自然散射光下進(jìn)行，胚培養(yǎng)用日光燈作光源，光強(qiáng)2000一3000勒克斯，每日光照15小時(shí)。
2 結(jié)果與討論
2.1影響種子培養(yǎng)的因素
2.1.1取樣時(shí)期于莎巴珍珠果實(shí)成熟前一周、成熟期及成熟后一周各取樣（種子）一次，培養(yǎng)二個(gè)月后測量胚長。結(jié)果表明，成熟前一周取樣的效果最好，培養(yǎng)后的胚長極顯著地大于成熟期和成熟后一周取樣的結(jié)果，而成熟期及成熟后一周取樣經(jīng)培養(yǎng)，其胚長間無顯著差異（見表1）。在種子培養(yǎng)過程中，隨著胚長的增加，胚的形態(tài)發(fā)育也漸趨成熟。取樣時(shí)期對胚的形態(tài)發(fā)育也有明顯影響（表2），如成熟前一周取樣，培養(yǎng)后胚的形態(tài)分布集中，以子葉胚為主，占70%,而另兩次培養(yǎng)的其胚形態(tài)發(fā)育不整齊，心形胚、魚，雷形胚和子葉形胚比例相近。
2.1.2種子培養(yǎng)持續(xù)天數(shù)莎巴珍珠果實(shí)成熟時(shí)胚長為592卜m,此時(shí)取樣的種子培養(yǎng)30,60和90天后，胚長分別達(dá)844,953及929協(xié)m,均極顯著地大于培養(yǎng)前的胚長，但它們之間則沒有顯著差異。這說明培養(yǎng)3.天已足夠，若再延長培養(yǎng)時(shí)間，則胚長增加不明顯。
2.1.3培養(yǎng)基中蔗糖濃度的影響于莎巴珍珠果實(shí)成熟時(shí)取樣的種子分別培養(yǎng)在基本培養(yǎng)基附加2,5,10和20%蔗糖的培養(yǎng)基上，二個(gè)月后測量胚長。在這四種蔗糖濃度的培養(yǎng)基一匕胚的生長隨著蔗糖濃度的增加而受到抑制。在2%蔗糖培養(yǎng)基上培養(yǎng)后胚長最大，而在20%蔗糖培養(yǎng)基上胚的生長完全受到了抑制。胚的形態(tài)發(fā)育亦隨著蔗糖濃度的降低而得到促進(jìn)，如在2%蔗糖濃度培養(yǎng)基上胚的形態(tài)以子葉胚為主，而在20%蔗糖濃度培養(yǎng)基上則以心形胚為主。
