分子中蛋白質(zhì)折疊的影響
蛋白質(zhì)是構(gòu)成生命體的基本物質(zhì)，人們很早就認識到蛋白質(zhì)的功能，我們在很多蛋白質(zhì)的研究中發(fā)現(xiàn)只有蛋白質(zhì)測定儀在實驗中是用處最大的一款儀器，可以節(jié)省很多的時間和精力。但是要完全闡明蛋白質(zhì)發(fā)揮功能的機制通常需要它的信息結(jié)構(gòu)，這些信息結(jié)構(gòu)不僅僅為其單獨發(fā)揮功能提供依據(jù)，也為蛋白質(zhì) - 蛋白質(zhì)相互作用提供了結(jié)構(gòu)學上的依據(jù)。研究蛋白質(zhì)折疊的過程，尤其是折疊的早期過程，即新生肽段的折疊過程是最終全面闡明中心法則的一個根本問題。在這一領(lǐng)域中，近年來的新發(fā)現(xiàn)對新生肽段能夠自發(fā)進行折疊的傳統(tǒng)概念做了根本的修正。在生命科學的基礎(chǔ)研究中,分離、提純蛋白質(zhì)是重要而繁鎖的工作。生物體中各種蛋白質(zhì)的氨基酸組成(或構(gòu)筑)不盡相同。鑒定純蛋白的最基本方法之一是測定其氨基酸的組分及含量。
幾年來,我們對一些蛋白質(zhì)樣品 (達電泳純)進行氨基酸分析,為鑒定蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與純度提供了一項指標。有些蛋白質(zhì)是國內(nèi)首次提取或報道。鑒定蛋白質(zhì)的性質(zhì)與純度,需要分析氨基酸的組成及含量。氨基酸分析定量準確程度與蛋白質(zhì)的水解條件至關(guān)重要。我們在雙蒸水與優(yōu)級純鹽酸共沸而蒸得的5.7mol/L 鹽酸水解浪中加入適量苯酚和琉基乙酸,能有效防止酪氨酸、甲硫氨酸等易氧化組分的破壞。氨基酸分析也是探討蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的途徑之一。這些關(guān)系各器官功能的活性蛋白質(zhì),氨基酸組成各有其特點。將分析數(shù)據(jù)輸入電腦,用自編程序,可以按標準模式繪制出各蛋白質(zhì)的氨基酸組成的特征圖像,便于鑒別。
在分離純化重組 DNA 技術(shù)基因工程表達產(chǎn)物時，很多利用大腸桿菌為宿主細胞的外源基因表達產(chǎn)物在細胞內(nèi)聚集成沒有生物活性的固體顆粒包含體。這些基因表達產(chǎn)物的一級結(jié)構(gòu)雖然正確，但其立體結(jié)構(gòu)是錯誤的，所以沒有生物活性。因此，為獲得天然狀態(tài)的目標產(chǎn)物，必須在分離回收包含體后，溶解包含體并設(shè)法使其中的目標蛋白質(zhì)恢復(fù)應(yīng)有的天然構(gòu)象和活性。分子伴侶幫助變性蛋白質(zhì)正確折疊的功能為解決上述困難提供了可能。近來利用固定化分子伴侶 GroE，研究了其對變性溶菌酶的復(fù)性作用，解決了分子伴侶的重復(fù)利用問題。有研究表明，分子伴侶在疾病診斷、環(huán)境檢測、物種鑒定、腫瘤治療、生物產(chǎn)品開發(fā)、農(nóng)作物育種等方面都有十分廣闊的應(yīng)用前景�？傊�，分子伴侶的研究成果必然會大大加深我們對生命現(xiàn)象的認識，同時也一定會增強我們與自然斗爭的能力和自身生存的能力。中國糧油儀器網(wǎng) http://www.pfyin.com/
